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相差生物顯微鏡和熒光生物顯微鏡觀(guān)察支原體

更新時(shí)間:2025-01-22      點(diǎn)擊次數(shù):896

支原體是一類(lèi)尺寸介乎細(xì)菌和病毒之間的原核細(xì)胞型病原微生物,沒(méi)有細(xì)胞壁,形態(tài)多樣,一般致病性弱,主要黏附在細(xì)胞膜上獲取營(yíng)養(yǎng),損傷細(xì)胞膜,影響細(xì)胞正常生命活動(dòng),進(jìn)而引起泌尿系統(tǒng)感染、沙眼、肺炎等疾病。支原體直徑為0.2~0.3μm,結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,球形,具有較大的可變性,使用光學(xué)顯微鏡高倍相襯觀(guān)察,如果看到細(xì)胞核周?chē)罅快o止或布朗運(yùn)動(dòng)的小黑點(diǎn),可以推斷大概率為支原體。以下是使用相差生物顯微鏡和熒光生物顯微鏡觀(guān)察支原體的具體方法:

一、相差顯微鏡觀(guān)察

1.MHL2800透明底 

生物顯微鏡MHL2800

相差顯微鏡能夠觀(guān)察活細(xì)胞和未染色的標(biāo)本,可以觀(guān)察到支原體呈暗色微小顆粒,有類(lèi)似布朗運(yùn)動(dòng)的表現(xiàn),在細(xì)胞表面或細(xì)胞之間游離或成群分布的形態(tài)和排列方式。支原體與細(xì)胞破碎后溢出的細(xì)胞內(nèi)容物如線(xiàn)粒體等頗相似,應(yīng)細(xì)加區(qū)別。

二、熒光顯微鏡觀(guān)察

3.正置熒光顯微鏡UB203i-FL (8) 

熒光顯微鏡UB203i-FL

熒光顯微鏡觀(guān)察需要使用特殊的熒光染料或抗體對(duì)支原體進(jìn)行標(biāo)記,根據(jù)熒光反應(yīng)判斷是否感染。支原體屬于原核生物,可以使用DAPI等細(xì)胞核熒光染色劑染色,還可以使用相差熒光染料或抗體標(biāo)記。一般來(lái)說(shuō),支原體感染的細(xì)胞在熒光顯微鏡下會(huì)呈現(xiàn)出綠色或紅色熒光,這取決于所使用的熒光染料和抗體。

2.光學(xué)顯微鏡觀(guān)察支原體 

應(yīng)用實(shí)例:在呼吸道九聯(lián)檢查中,包含支原體肺炎檢測(cè)。使用熒光顯微鏡觀(guān)察時(shí),如果觀(guān)察到紅色細(xì)胞外圍出現(xiàn)明亮的綠色熒光反應(yīng),且形態(tài)為明顯的細(xì)胞膜或者胞漿,則可以判定為陽(yáng)性,這些綠色的熒光信號(hào)標(biāo)記的就是肺炎支原體。相反,如果紅色細(xì)胞周?chē)鸁o(wú)熒光或少量綠色熒光,且熒光較弱,則判定為陰性,這意味著樣本中未檢測(cè)到肺炎支原體。

三、觀(guān)察注意事項(xiàng)

支原體主要黏附在細(xì)胞膜上生存,沒(méi)有細(xì)胞壁,通常呈圓形或橢圓形,一般呈末端尖銳、表面有許多小突起的形態(tài)特征。

在觀(guān)察過(guò)程中,應(yīng)注意區(qū)分支原體與其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)或污染物。

熒光顯微鏡觀(guān)察診斷支原體肺炎屬于血清學(xué)檢測(cè),要等發(fā)病后4~7日,體內(nèi)產(chǎn)生免疫反應(yīng)才能檢測(cè)出來(lái),主要適合首診檢測(cè)陰性,復(fù)診仍然懷疑肺炎支原體感染的情況。

通過(guò)相差顯微鏡和熒光顯微鏡的觀(guān)察,可以更深入地了解支原體的形態(tài)、分布和感染情況,為疾病的診斷和治療提供有力支持。

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